“实验目的”初步掌握蛙或蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备的方法，了解神经肌标本在实验中的应用。
“实验原理”
蛙或蟾蜍的一些基本生理功能与温血动物近似，离体的神经肌标本在一定时间内能保持其功能，体现活组织的某些共同生理特性。因此在生理实验中常用其坐骨神经腓肠肌标本来观察兴奋性、刺激与反应的关系、骨骼肌的收缩形式等。
“实验对象”蟾蜍或蛙
“实验用品”蛙类常用手术器械一套（粗剪刀、手术剪、眼科剪、镊子、金属探针、玻璃分针、木蛙板与玻板、蛙脚钉、锌铜弓），烧杯、培养皿、滴管、手术线、任氏液等。
“实验准备和步骤”
1.
破坏脑和脊髓。取蛙一只，用自来水冲洗干净。以左手无名指和中指夹住蛙的后肢，拇指压住蛙背，食指压住蛙头前端，使头前倾。可见头部背面正中线上有一凹陷处，即枕骨大孔，右手持金属探针由此垂直刺入1～2mm，再将金属探针向头前刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织。而后退针尖至皮下，倒转针尖再从枕骨大孔转向下方，刺入椎管捣毁脊髓。此时蛙四肢瘫软，表明中枢神经系统已完全破坏，抽出探针。
2.
剪去躯干上部及内脏。在蛙两腋稍下方的背部，用粗剪刀剪断脊柱，使蛙头和内脏自然下垂，沿背部两侧剪去其一切内脏和头胸部（注意不能伤及坐骨神经），仅保留一段脊柱及其两侧的坐骨神经和后肢。
3.去皮。左手用镊子夹住脊柱断端，右手握住断端边绿皮肤，向下剥去全部皮肤。将标本放在盛有任氏液的培养血中。将手和用过的器材洗净。
4.分离两腿。用镊子夹住脊柱，用粗剪刀沿脊柱正中至耻骨联合中央剪开分成两半（注意不能伤及坐骨神经），将一条腿浸于盛有任氏液的培养血中。
5.
游离坐骨神经。取一腿放在玻板上，用玻钩沿脊柱向尾端游离坐骨神经至大腿根部，保留坐骨神经起始端的1～3个脊锥骨，把其余的脊柱和肌肉全部剪去。再在后肢股部背侧股二头肌与半膜肌之间找出坐骨神经大腿段，从上向下小心分离至腘窝，用玻钩轻轻提起坐骨神经、剪去沿途分支，游离坐骨神经至膝关节处，再将膝关节以上所有肌肉及股骨上2/3部分剪去，就做成了坐骨神经小腿标本。
6.分离腓肠肌。在跟腱处穿线结扎后剪断跟腱，提起结扎线分离腓肠肌至膝关节处，然后沿膝关节下缘将小腿其余部分全部剪掉，就做成了坐骨神经腓肠肌标本。
7.检查标本的兴奋性。用任氏液沾湿锌铜弓轻触坐骨神经，如腓肠肌发生明显收缩，表明标本兴奋性良好，将标本放入盛有任氏液的培养皿中备用。
“注意事项”
1.破坏蛙脑和脊髓时用纱布包其背部和上下肢，千万小心避免蟾蜍毒素溅入眼内，一旦出现该情况，及时用清水冲洗。
2.要避免对神经的过度牵拉，用玻钩分离神经，尽量减少神经与金属器械的接触，
3.要用任氏液经常湿润标本防止干燥，保持其兴奋性。
“思考题”
1.何谓兴奋性？怎样检查神经肌标本的兴奋性？
2.从刺激神经到引起肌肉收缩要经过哪些过程？
