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第12章 糖蜜原料的处理

一、糖蜜的来源及特点

糖蜜是甘蔗或甜菜糖厂的一种副产品,又叫废糖蜜。糖蜜含糖量较高,有相当数量的可发酵性糖,只需添加酵母便可直接发酵生产酒精,是大规模生产酒精的良好原料。

1.甘蔗糖蜜

我国南方各省盛产甘蔗,甘蔗糖厂较多,因此,甘蔗糖蜜的产量也很大,产量为原料甘蔗的2.5%~3%。甘蔗糖蜜中含有大量的蔗糖和转化糖。由于产地的土质、气候、原料品种、收获季节和制糖方法、工艺条件的不同,糖蜜中的成分也不同。

甘蔗糖蜜为棕黄色至黑褐色的均匀浓稠液体,要求无夹杂物,无异臭味,无发酵迹象。根据糖分含量和微生物的数量不同可分为3级,但各地区的具体要求略有差异。

例如四川内江糖厂的糖蜜按下列要求可分为3级:

一级糖蜜:含糖分为58%~65%,含微生物1.0~9.0万个/g。

二级糖蜜:含糖分为52%~58%,含微生物15~50万个/g。

三级糖蜜:含糖分为46%~52%,含微生物100~800万个/g。

广东顺德糖厂的糖蜜按下列要求分为3级:

一级糖蜜:含糖分为50%以上。

二级糖蜜:含糖分为48%~50%。

三级糖蜜:含糖分为48%以下。

2.甜菜糖蜜

甜菜糖蜜的产量为甜菜的3%~4%。在我国,甜菜的生产主要在东北、西北、华北等地。

甜菜糖蜜与甘蔗糖蜜的主要区别是甜菜糖蜜中转化糖含量极少,而蔗糖含量较高。甘蔗糖蜜呈微酸性,pH6.2;而甜菜糖蜜则呈微碱性,pH7.4.甘蔗糖蜜中氮素含量低,占0.5%左右;甜菜糖蜜中氮素含量高,占1.68%~2.3%,但是占甜菜糖蜜含氮量50%的甜菜碱很少被酵母消化(强烈通风下仅消化5%)。

不论是甘蔗糖蜜还是甜菜糖蜜中的糖类大多数是可发酵性糖,经过稀释,添加部分营养盐,就可用酵母发酵,生成酒精。利用糖蜜生产酒精,可以省去蒸煮、制曲、糖化等工序,生产成本低,设备简单,生产周期短,工艺操作简便。但是,糖蜜发酵酒精比淀粉糖化醪发酵困难。这是因为糖蜜中存在着大量的非糖成分,特别是盐类与重金属离子的存在,抑制了酵母的繁殖与酒精的生成,目前已驯养出新的酵母菌种,解决了糖蜜发酵困难的问题。由于制糖煮炼技术的不断提高,糖蜜中残留的蔗糖和还原糖大大减少,如果非糖杂质不能除去,则糖蜜纯度必将下降,从而导致发酵率下降。因此,要改进糖蜜发酵技术,以适应糖蜜纯度下降的情况,提高发酵率。

糖蜜中干物质的浓度在80~90°Bx,所以糖蜜必须进行稀释后才能用于酒精发酵。

糖蜜中有很多杂菌,特别是产酸细菌,所以需要灭菌以及调酸处理。甜菜糖蜜的pH为7.4,需要先用硫酸中和调整至微酸性pH4~4.5.甘蔗糖蜜的pH呈微酸性,添加少量硫酸调整pH为4~4.5即可。

糖蜜中含有5%~12%的胶体物质,由果胶质、焦糖和黑色素等组成,酒精发酵时产生大量泡沫,因而降低发酵罐的利用率。同时胶体物质会吸附在酵母的表面,使酵母新陈代谢作用发生困难,特别是焦糖和黑色素对酵母的酒精发酵作用抑制较大。

糖蜜中黑色素的产生是由于局部过热,葡萄糖脱水生成α-羟甲基糠醛。α-羟甲基糠醛与糖蜜中的氨基酸化合便生成深褐色的黑色素。

糖蜜在制糖煮炼过程中常因局部过热,使部分可发酵性糖焦化变成焦糖和黑色素,这不仅损失一部分可发酵性糖,而且对酵母的酒精发酵有抑制作用,使发酵率降低。因此,糖蜜中的焦糖、黑色素与果胶质等应除去,以提高设备的利用率和发酵率。

糖蜜中的灰分含量很大,一般糖蜜中的灰分为5%~16%。由于制糖提炼技术的提高,糖蜜中的灰分明显增加。糖蜜中的杂质多、纯度低,不仅使发酵率下降,同时也会使设备易产生积垢,因此,糖蜜中的灰分、杂质应尽量除去。

糖蜜中含有微量的重金属离子,特别是铜离子(Cu2+)对酵母有抑制作用。Cu2+含量达5mg/L时,酵母开始受到抑制,含量达10mg/L时,酵母停止生长。因此,对糖蜜中微量的重金属离子应引起足够的注意。

糖蜜作为发酵培养基,还需要添加适当的营养成分,以便各种成分的比例协调。

糖蜜中非糖杂质多,杂菌多,这就要求酵母菌种强壮,耐高温、耐高酸、耐高渗透压。

糖蜜酒精发酵代谢生成酯、醛等头级杂质及杂醇油较多,同时蒸馏过程中泡沫较多,也易形成积垢,对成品酒精质量影响较大,因此,在利用糖蜜发酵生产酒精时,应该在醪塔与精馏塔中间增加一排醛塔。

二、糖蜜的处理方法

利用废糖蜜发酵可以生产不同的产品。生产不同的产品需要不同的发酵培养基,所以对糖蜜的处理要求也不同。

(一)糖蜜发酵生产酒精

糖蜜发酵生产酒精时,糖蜜的处理包括稀释、酸化、灭菌、澄清和添加营养盐等过程。

1.稀释

单浓度流程:稀糖液浓度22~25°Bx。

双浓度流程:酒母稀糖液浓度12~14°Bx,基本稀糖液浓度33~35°Bx。

2.酸化

酸化的目的是防止杂菌的繁殖,加速糖蜜中灰分与胶体物质沉淀,同时调整稀糖液的酸度,使适于酵母的生长。甘蔗糖蜜为微酸性,甜菜糖蜜为微碱性,调酸至pH4.0~4.5.加硫酸可使糖蜜中的Ca2+生成硫酸钙沉淀,因而可以加速糖蜜中胶体物质与灰分一道沉淀除去。通常用硫酸酸化,也可用盐酸,但盐酸的腐蚀性较大。

3.灭菌

糖蜜中含有大量的微生物,包括野生酵母、白念珠菌以及乳酸菌等,因此需要进行灭菌。灭菌方法有两种:

(1)加热灭菌 加热至80~90,维持1h即可。

(2)药物防腐 常用的防腐剂为:漂白粉(200~500g/t),甲醛(600mL/t),氟化钠(0.01%),五氯代苯酚钠(0.004%)。实验结果表明五氯代苯酚钠的效果最好,使用时应添加在未酸化的糖蜜稀释液中,防止它在酸性环境中分解成五氯苯酚和钠盐。

4.澄清

糖蜜中含有的胶体物质、灰分和其他悬浮物质,对酵母的生长和酒精发酵是有害的,应尽可能除去。澄清的方法有以下三种。

(1)加酸通风沉淀法 将糖蜜加水稀释至50°Bx,加入0.2%~0.3%的浓硫酸,通入压缩空气1h,静止澄清8h,取出上清液即可。此法既可以挥发有害物质,又可以提高糖液中的氧含量,利于酵母的增殖。

(2)热酸处理法 较高的温度和酸度,对于杀灭有害微生物和沉淀作用是有利的。先把糖蜜加水稀释到浓度为40°Bx,然后加入一定量的硫酸,调pH至4~4.5,放入澄清槽加热至80~90,通风30min后,在70~80保温,静止澄清8~12h,然后取出澄清液冷却即可。从提纯效果看,这个方法比冷酸通风处理法好。从减少设备腐蚀、不需冷却设备、缩短生产周期方面考虑,大规模生产还是采用冷酸通风沉淀方法较适宜。

也可添加聚丙烯酰胺(PAM)絮凝剂进行酒母稀糖液的澄清处理。先将糖蜜加水稀释至40~50°Bx,加一定硫酸调pH至3~3.8,加热100,添加8mg/L的PAM,搅拌均匀,絮凝澄清静止1h,取上清液即可。

(3)机械分离法 采用压滤法或离心机分离法。

可以只考虑用于酒母的稀糖液进行澄清处理,而对基本糖液则不进行澄清处理。

5.营养盐的添加

稀糖液中常常缺乏酵母营养物质,因此必须对糖蜜进行分析,了解营养物质的缺乏程度,然后适当添加必要的营养成分。

(1)甘蔗糖蜜需要添加的营养物质

①氮源:甘蔗糖蜜含氮约0.5%,其中能被酵母利用的氨基态氮及其他氮素仅为20%~25%,不能满足酵母生长繁殖的需要,故需添加氮源。普遍采用硫酸铵作为氮源,用量为糖蜜的0.1%~0.12%,如果添加尿素,用量通常为硫酸铵的一半。也可以添加酵母自溶物或麸曲作为氮源的补充。

②磷源:多数采用钠、钾、铵、钙盐,因溶液为酸性,适于酵母的生长繁殖和酒精的发酵,如采用过磷酸钙,用量为糖蜜的0.25%~0.3%。

③镁盐:镁盐不仅能促进酵母的生长、繁殖,扩大酵母生长素的效能,同时也能促进酒精发酵。通常添加硫酸镁,用量为糖蜜的0.04%~0.05%。

④生长素:酵母必要的生长素有维生素B1、维生素B2、烟酸、肌醇、生物素及泛酸等,一般是添加适量的玉米浆、米糠或麸曲自溶物等作为酵母生长素的补充。

(2)甜菜糖蜜所需添加的营养盐 一般甜菜糖蜜在通风情况下是不缺氮的,但在不通气培养酒母以及糖蜜含氮量低时,可加入硫酸铵或酵母自溶液来补充氮源,一般硫酸铵用量为糖蜜的0.36%~0.4%。采用过磷酸钙作磷源,用量为甜菜糖蜜量的1%。也可直接用磷酸作磷源,用量为0.03%;还可用磷酸氢二铵(NH4)2HPO4作为磷源,它除了含磷,还含有氮,因此可适当减少硫酸铵的用量。

(二)糖蜜发酵生产谷氨酸

糖蜜如不处理,因生物素含量过高,所以不能积累谷氨酸。因此,必须对糖蜜进行处理。处理方法如下。

1.降低生物素含量

(1)活性炭处理法 用活性炭吸附除掉生物素。

(2)水解-活性炭处理法 采用盐酸水解甘蔗糖蜜,再用活性炭处理去掉生物素。

(3)树脂处理法 甜菜糖蜜可用非离子化脱色树脂脱除生物素。

(4)亚硝酸处理法 用亚硝酸处理糖蜜,破坏生物素。

2.添加青霉素

在生产菌的生长初期添加青霉素,阻止细胞壁的合成,导致谷氨酸在菌体外部大量积累。

3.添加表面活性剂

各种非离子系、阳离子系、阴离子系及两性系表面活性剂,能够提高谷氨酸的收得率。例如添加阳离子系表面活性剂CTAC(氯化十六烷基三甲铵),可大量积累谷氨酸。如果培养基中的生物素浓度增加时,必须相应地提高表面活性剂的添加量才有效。吐温60、吐温40等非离子系表面活性剂有青霉素一样的效果。饱和脂肪酸蔗糖酯也有青霉素一样的作用,其中硬脂酸酯有显著效果。除了表面活性剂和脂肪酸外,各种醇类,特别是在培养5h时添加异丁醇1.0%~1.25%,效果明显。

4.追加糖蜜

先用缺乏生物素的糖培养基培养谷氨酸生产菌,当达到最大生长量时,连续补加甘蔗糖蜜,发酵30h,产谷氨酸在4g/100mL以上。

5.选用非生物素缺陷型突变株

采用非生物素缺陷型突变株,从遗传上解除生物素对谷氨酸积累的调控。例如,油酸缺陷型D-248,能在生物素过剩的条件下积累大量的谷氨酸。该菌的生长量可随油酸添加量的增加而成比例地增加。添加吐温20、吐温40、吐温60、钙离子以及少量玉米浆均可促进其生长。添加油酸量为0.7mg/mL时,生长量达到最大,但只在0.25mg/mL的油酸添加量时,谷氨酸产量最大。

(三)糖蜜发酵生产柠檬酸

糖蜜中所含的金属离子和营养物能促进菌体的过度生长,阻碍产酸,因此需要经过一些处理,处理方法如下。

1.稀释

加水量一般为1:1,稀释用水可采用生产中的各种回收废水。

2.调节pH

一般用硫酸或碳酸钠调节至pH6~7.2.

3.添加黄血盐

参考用量为0.6~3g/kg,具体用量应根据原料中的含氮量和金属离子量而定。在稀释调pH后,先加入总量的2/3,煮沸后再加入剩余的1/3,也可以一次添加,再煮沸。冷却后调节游离黄血盐浓度在20mg/L左右,pH调至6.5~6.8.或用季铵碱代替20%~40%黄血盐,即在60时添加黄血盐,30min后加入季铵碱,对提高柠檬酸产量有利。

4.添加EDTA

一般不单独使用,而是配合黄血盐使用。先加入部分黄血盐,煮沸后加入Na2EDTA,继续煮沸20min,用试纸检测黄血盐,当反应阴性时,再加入10%黄血盐,沸腾5min后再检测,直至反应阳性。这样做可以调节无机盐和痕量元素含量在适当水平,提高柠檬酸产率。

5.离子交换法

一般只要通过阳离子交换柱,除去大部分金属离子即可。糖蜜先用1~2倍水稀释,通过离交柱,pH可能下降到3左右,用氨水回调至pH4.5~5.

6.吸附处理法

吸附作用是除去色素和胶体物质,有利于发酵,防止生成泡沫。吸附剂可用活性炭、皂土、白土等。对于活性炭,使用中性炭较好。加入黄血盐搅匀后,再加入10g/L活性炭,搅拌数分钟,静置过夜,取上清液使用。

7.交互沉淀法

将糖蜜用水(1:1.5)稀释后,加入H2SO4或H3PO4使pH降到2.8~2.0,室温下放置过夜,加入新配制的石灰乳调至pH7.2~7.4,保温65~70,搅拌30min,同时加入活性炭(0.8%),继续搅拌30min,过滤,加水稀释至16°Bx,再用盐酸调至pH4.0,加营养盐灭菌即可,必要时再结合黄血盐法。

8.稀释补料法

先采用浓度很低的糖蜜发酵,待菌体生长期结束后,再补加浓糖蜜。冲淡后的稀溶液其他营养物可能不足,应考虑添加适量的营养盐(如NH4NO3、KH2PO4、MgSO4等)。当孢子发芽完毕,再补充浓糖蜜,使总糖达到预定水平。

9.使用添加剂

添加剂除了营养盐之外,还有防止微生物污染和促进柠檬酸积累的一些试剂,现分述如下。

营养盐常用的有:NH4Cl、(NH4)2SO4、MgSO4、KH2PO4、ZnSO4等。

在黄血盐处理后的培养基中加入连二亚硫酸钠(Na2S2O4)、焦亚硫酸钾(K2S2O5)或亚硫酸氢钠(NaHSO3),可以显著增加黑曲霉的柠檬酸产率。

糖蜜经稀释、调pH和黄血盐处理后,在沸腾的溶液中加入20~200mg/L三聚磷酸钠,冷却后再加营养盐,然后稀释至预定糖度,可以提高柠檬酸产率。

黄血盐处理后,将良好的成熟发酵醪中分离出来的沉降物加入糖蜜溶液中,可以更有效地利用低发酵活性的糖蜜,并且可以增加柠檬酸的提取率。这种沉降物预先经过空气干燥后,每升糖蜜溶液中加入1~3g即可达到预期效果。

10.糖蜜培养基的灭菌

糖蜜中所含的微生物主要是耐高温的芽孢菌,要彻底杀灭它们需要在高于120的温度下维持30min以上,或者煮沸2h,这在工业上很困难,而且耗能高。另外,长时间高温会造成糖的分解,分解产物对发酵的抑制性很强。现在多采用加热和化学药品联合灭菌法,或者在灭菌后加入抗菌物质。

在抗菌物质存在下,热杀菌的条件比较“温和”。例如,在糖蜜培养基灭菌前后加入一些化学药物(如金霉素、5-硝基呋喃-2-丙烯酸、H2O2或HCHO),可以降低热杀菌强度,增加柠檬酸产率。

用吖啶黄和加热联合灭菌法可以有效抑制芽孢菌。糖蜜在80灭菌30min后,再加入次氯酸钙〔Ca(ClO)2〕和0.1%NH4Cl在40~50处理30~45min,可以达到完全灭菌的要求,并促进黑曲霉生长和产酸。

还可以采用过滤除菌的方法。用经过表面活性剂处理的、具有抗菌活性的聚乙烯醇或聚丙烯腈离交纤维滤层除菌,可以增加柠檬酸产率并提高培养基浓度。

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